正常人梅毒报告单（梅毒螺旋体特异抗体测定是什么意思）

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1、TPHA法检测梅毒螺旋体抗体　　一、概述：　　梅毒螺旋体存在于病人的血液或脑脊液内，在特殊厌氧环境里可体外人工培养。

2、当病人感染梅毒螺旋体后3-4周，可在血液中检出针对梅毒螺旋体特异性抗体，并在治疗后相当长时间内仍然可检出。

3、在病人血清中可检出二种抗体，一种是针对非螺旋体抗原的抗体（即针对牛心肌磷脂的抗体，如RPR及国内一些EIA和金标法均是检测此非特异性抗体），这种抗体在疾病活动期可检出，但在治疗后或疾病转入慢性期后会很快下降，而另一种是针对螺旋体抗原的特异性抗体,治疗后仍可在相当长的时间内检出，在疾病的慢性期也保持高滴度反应。

4、OMEGA TPHA 试验是一种检测针对螺旋体抗原的抗体的特异的、灵敏的被动的血凝试验。

5、OMEGA TPHA 试剂盒的质量标准已经中国药品生物制品检定所核定。

6、　　二、试验原理：　　试验血球为用梅毒螺旋体特异性抗原包被经过醛化和鞣化的鸡红细胞，对照血球为没用上述抗原包被的经过醛化和鞣化的鸡红细胞，如果是阳性标本，当和致敏的鸡红细胞混合后，抗体和抗原的结合会引起致敏血球的凝集，在血凝板底部形成凝集块，如为阴性标本，则血细胞在孔底形成致密的沉淀。

7、　　三、试剂盒组成： 试验细胞悬液 8.5ml 阳性对照血清 2 ml 稀释液 2 0ml　　对照细胞悬液 8.5ml 阴性对照血清 2 ml 细胞滴管 2 支　　以上所有试剂均为工作浓度。

8、试剂盒中的阴阳对照血清已经1：20稀释，可直接实验不必再稀释。

9、阳性对照的效价为1：2560左右。

10、　　细胞滴管的滴量为每滴75ul，其中红色滴管用于致敏血细胞，白色滴管用于对照血细胞。

11、　　待检标本：应用血清标本，脑脊液标本。

12、血清标本可贮于—20℃保存，但保存不应超过4至6星期。

13、标本不应有溶血或含有脂肪。

14、标本要防止混入唾液，否则会影响结果的正确性。

15、　　四、操作方法：　　1.在反应板的第一排：每孔加25u（1滴）稀释液　　在反应板的第二排：每孔加100ul（4滴）稀释液　　在反应板的第三排和第四排：每孔加25ul（1滴）稀释液　　2.取标本25ul，加在第一排的孔中。

16、　　3.对样品进行以下稀释：用25 ul移液器将加样后的第一排孔中的液体混匀后取出25 ul加入第二排的孔中，混匀后再取25 ul加入第三排的孔中，混匀后，从第三排孔中吸出25 ul丢弃，另从第二排孔中取25 ul加入第四排孔中，混匀后，再从第四排孔中吸25ul丢弃。

17、　　4.在第四排孔中加75 ul（1滴）试验细胞悬液，在第三排孔中加75 ul（1滴）对照细胞悬液。

18、轻轻摇晃反应板后加盖静置45—60分钟后判读结果。

19、　　五、结果判断：　　1.目测：凡出现细胞凝集为阳性反应，不出现凝集者阴性反应。

20、　　—/不凝集：细胞沉积在板孔中央呈边缘光滑的纽扣状；　　±/可凝：细胞沉积在板孔中央呈边缘光滑的环状；　　+/凝集：细胞形成多边形成或不规则环状沉积。

21、　　2+—4+/强凝集：细胞形成边缘粗糙不规则形状或薄膜状覆盖到板孔底。

22、　　2.加入对照血细胞的反应孔不应出现凝集，如果出现凝集，说明存在抗血细胞抗体，应重复试验。

23、重复试验时，应经1000rpm离心5分种，取上清液用稀释液按1：5稀释，再进行试验，如果加入试验细胞悬液仍出现凝集，可判为阳性结果。

24、　　3.仪器测定：可应用奥林帕斯的PK7200或改进后的雷勃MK3酶标仪。

25、　　六、储存4—8℃ ，切勿冷冻。

26、注意运输和储存过程中切勿将试剂盒倒置。

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